Dynamic BIOSENSORS HeliX plis Reducing Agent Twous 1

Dynamic BIOSENSORS HeliX plis Reducing Agent Twous 1

Karakteristik kle

  • Pèmèt pou rediksyon nan lyezon disulfid lè l sèvi avèk TCEP.
  • Konpatib ak pwoteyin ak antikò (MW> 20 kDa).
  • Sit espesifik rediksyon nan antikò.
  • Kouple imedyat nan molekil redwi posib (al gade nan manyèl itilizatè HK-MAL).
  • Rediksyon nan ligand miltip ka fèt an menm tan an.
  • Gen ladann reyaktif pou de reyaksyon rediksyon endividyèl.

Deskripsyon Product

Nimewo Lòd: RK-PA-1

Tablo 1. Kontni ak Enfòmasyon sou Depo

Materyèl Cap Kantite lajan Depo
TCEP (500 mM) Wouj 2 x 20 µL -20°C
Diminye tanpon [1] Blan 2 x 1.8 mL -20°C
Pirifikasyon vire kolòn Wouj 4 x 2-8 °C
Tib reyaksyon 2.0 mL pou kolòn spin pirifikasyon 4 x RT
Inite filtre santrifujeur (10 kDa MWCO) 2 x RT
Tib koleksyon santrifugasyon 4 x RT

Pou rechèch itilize sèlman.

Pwodui sa a gen yon lavi etajè limite, tanpri gade dat ekspirasyon sou etikèt la.

ENPÒTAN Pwodwi yo ka anbake nan diferan tanperati, men depo yo ta dwe respekte direktiv ki endike nan Tablo a. Sispansyon résine nan kolòn spin pou pirifye a gen 0.02% azid sodyòm.

Lòt Materyèl obligatwa

Tablo 2. Lòt Materyèl

Materyèl Kòmantè
Benchtop mikrosantrifij Ranje vitès obligatwa ant 1,000 xg ak 13,000 xg
Vortex
1.5 mL tib reyaksyon

Tout solisyon ki nesesè yo ak tanpon yo enkli nan twous la.

Rediksyon 3-etap nan yon byomolekil nan yon tib reyaksyon

Tanpri li tout pwotokòl la anvan ou kòmanse ak fè tout etap san entèripsyon.

KONSÈY Pwotokòl sa a ka fèt an menm tan pou plizyè reyaksyon kouple

Tanpon Echanj Pwoteyin / Antikò

  1. Mouye manbràn inite filtre santrifujeur la ak 100 µL Tanpon Rediksyon.
  2. Ajoute approx. 200 µg (jiska 500 µg) pwoteyin/antikò nan inite filtre a soti nan etap 1. Si sa nesesè, ajoute Tanpon Rediksyon nan filtè a jiskaske yon volim maksimòm de 450 µL rive nan epi santrifije nan 13,000 xg (jiska 14,000 xg) pou 5. min ak jete koule-a.
  3. Ajoute 350 µL Tanpon Redui epi santrifije nan 13,000 xg pou 5 min epi jete koule-a ankò.
  4. Repete etap 3 a, yon lòt fwa ankò ak yon tan santrifujasyon final 10 minit pou jwenn yon volim final apeprè. 80 µL.
  5. Kolekte sampswa avèk yon pipèt 100 µL nan yon nouvo tib oswa lè w mete aparèy filtre a tèt anba nan yon nouvo tib santrifujeur, santrifuje pou 2 min nan 1000 x g.

Diminye ak TCEP

  1. Prepare yon solisyon 2.5 mM TCEP nan Tanpon Rediksyon lè w ajoute 1 µL 500 mM TCEP nan 199 µL Tanpon Rediksyon.
    Prepare toujou dirèkteman anvan ou itilize.
  2. Ajoute Diminye Tanpon nan s laample flacon pou yon volim total de 98 µL epi ajoute 2 µL solisyon 2.5 mM TCEP pou jwenn yon konsantrasyon final 50 µM TCEP. Melanje reyaksyon an pa pipette leve, desann.
  3. Enkube solisyon an nan 37 ° C nan 400 rpm pou 2 èdtan asire rediksyon konplè.

Pirifikasyon ak Konsantrasyon

  1. Ekilibre de kolòn spin pirifikasyon (bouchon wouj) pou yon sèl lave TCEP:
    a. Retire sele anba kolòn nan epi dekole bouchon (pa retire bouchon).
    b. Mete kolòn nan nan yon tib reyaksyon 2.0 mL.
    c. Santrifije nan 1,500 × g pou 1 min pou retire solisyon depo a.
    d. Ajoute 400 µL Tanpon Rediksyon nan kabann résine kolòn nan. Santrifije nan 1,500 × g pou 1 min pou retire tanpon.
    e. Repete etap d epi jete tanpon ki soti nan tib reyaksyon an. Kolòn spin pirifikasyon an ta dwe kounye a nan yon eta sèk.

TCEP lave

a. Mete kolòn ki soti nan etap anvan an nan nouvo tib reyaksyon 1.5 mL.
b. Retire bouchon kolòn vire nimewo 1 epi vide s laample nan tèt kabann lan résine.
c. Santrifije nan 1,500 xg pou 2 min pou kolekte s laample (koule-a). Jete kolòn vire pirifikasyon an apre w fin itilize.
d. Retire bouchon kolòn vire nimewo 2 epi vide s laample soti nan etap anvan an nan kabann nan résine.
e. Santrifije nan 1,500 xg pou 2 min pou kolekte s laample (koule-a). Jete kolòn vire pirifikasyon an apre w fin itilize.
f. Thiol couplage selon manyèl itilizatè (HK-MAL-1 oswa HK-MAL-2) nan redwi sample ka fèt.

Enfòmasyon adisyonèl

Tanpon Echanj ak Konsantrasyon ak Inite Filtè Santrifij 

  1. Pran yon inite filtre santrifujeur, ajoute volim apwopriye nan tanpon nan aparèy filtre a, epi bouchon li.
  2. Mete aparèy filtre bouchon nan rotor santrifij la, aliman braslè bouchon an nan direksyon sant rotor la; kontrebalans ak yon aparèy menm jan an.
  3. Vire aparèy la nan 13,000 xg (oswa 14,000 xg) pou tan yo bay la.
  4. Retire koule nan epi repete etap 1-3.
  5. Retire aparèy ki rasanble nan santrifij la epi separe aparèy filtre a ak tib mikrosantrifij la.
  6. Pou refè konjige a, mete aparèy filtè a tèt anba nan yon tib santrifujeur pwòp, aliman bouchon louvri nan direksyon sant rotor la; kontrebalans ak yon aparèy menm jan an. Vire pou 2 minit nan 1,000 xg pou transfere s laample soti nan aparèy la rive nan tib la.
    Enfòmasyon adisyonèl

Nimewo Lòd itil

Tablo 3. Nimewo Lòd

Non pwodwi Kantite lajan Lòd No
HeliX ® Thiol kouple twous 1 5 x HK-MAL-1
HeliX ® Thiol kouple twous 2 5 x HK-MAL-2
Inite filtre santrifujeur (3 kDa MWCO) Xn PC. CF-003-5
Inite filtre santrifujeur (10 kDa MWCO) Xn PC. CF-010-5
10x tanpon A [2] 50 mL (bay 500 mL) BU-P-150-10
5x tanpon B [3] 50 mL (bay 250 mL) BU-P-1000-5

Kontakte

Dynamic Biosensors GmbH Dynamic Biosensors, Inc
Perchtinger Str. 8/10 300 Trade Center, Suite 1400
81379 Minik Woburn, MA 01801
Almay USA

Enfòmasyon sou lòd order@dynamic-biosensors.com
Sipò teknik support@dynamic-biosensors.com

  1. Diminye tanpon: 100 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 300 mM NaCl, 5 mM EDTA, pH 7.4
  2. Tanpon A: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2
  3. Tanpon B: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 1 M NaCl, pH 7.2

SIPÒ KLIYAN

www.dynamic-biosensors.com
Enstriman ak chips yo Enjenieri ak manifaktire nan Almay.
©2024 Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. Tout dwa rezève.
Logo

Dokiman / Resous

Dynamic BIOSENSORS HeliX plis Reducing Agent Twous 1 [pdfManyèl Itilizatè
RK-PA-1, HeliX plis Twous Ajan Diminye 1, HeliX Plus, Twous Ajan Diminye 1, Twous Ajan 1, Twous 1

Referans

Kite yon kòmantè

Adrès imel ou p ap pibliye. Jaden obligatwa yo make *