Sistèm analiz laboratwa konplètman otomatik heliX cyto dinamik BIOSENSORS

Espesifikasyon

• Non pwodwi: HeliX sito
• Manifakti: Dynamic Biosensors GmbH
• Vèsyon: 1.0

Enfòmasyon sou pwodwi

• Sistèm heliX cyto a fèt pou Sitometri Entèraksyon yon sèl selil (scIC) pou mezire sinetik lyezon molekil ki make ak fliyoresan ak sib sou sifas selil yo nan yon fason ki rezoud nan tan.

Enstriksyon Itilizasyon Pwodwi

Sèvi ak chip heliXcyto a

• Chip heliXcyto a gen yon sèl kanal mikrofluidik ak pwen elektwòd pou kaptire ak mezire selil yo. Asire w ke chip la byen plase epi swiv enstriksyon yo pou pyèje selil yo.

Chip Antretyen

• Sèvi ak Chip Antretyen an sèlman pou netwayaj, tès, ak operasyon antretyen. Evite sèvi ak li pou eksperyans pou anpeche kontaminasyon.

Kouri tanpon

• Sèvi ak Running Buffer 1 (RB 1) pandan mezi yo. Gade fèy konpatibilite scIC ki nan gid prensipal la pou jwenn enfòmasyon detaye.

Analiz Sensorgram

• Kontwole kapteurgram nan an tan reyèl nan lojisyèl heliOS pandan mezi yo. Analize repons fliyoresan an sou tan pou ekstrè to sinetik yo.

Pasivasyon

• Konsidere itilizasyon pasivasyon kòm yon etap opsyonèl pou anpeche absòpsyon analit la lè w enkube yon reyaktif pasivasyon sou chip la.

Nòmalizasyon

• Normalizasyon se yon pwosesis pou estandarize done pou konparezon ak analiz. Swiv pwosedi normalizasyon yo jan manyèl itilizatè a di sa.

ENTWODIKSYON

• Gid sa a se yon ti rezimeview sistèm heliXcyto a ak kapasite li yo. Tout chapit yo devlope nan gid prensipal heliXcyto a ki disponib nan https://www.dynamic-biosensors.com/helios-download-latest/

Terminoloji heliXcyto Sitometri Entèraksyon yon sèl selil

• Sitometri Entèraksyon Single-cell (scIC) se yon teknoloji ki mezire sinetik lyezon yon molekil ki make ak fliyoresan (analit) ak yon sib (ligand) sou sifas selil la lè li anrejistre siyal fliyoresan nan yon fason ki rezoud nan tan.

Analite

• Analit se yon molekil ki make ak fliyoresan nan yon faz mobil ki ka mare ak yon sib sou sifas yon selil.

Ligand

• "Ligand" se non yo itilize nan lojisyèl heliOS la pou dekri yon sib sou sifas selil la kote yon analit ka mare. Sa ka yon molekil reseptè, yon lipid, yon sik oswa yon lòt molekil sifas selil.

Pyèj Selilè

• Pyèj selilè yo se kaj polymère biokonpatib ki pèmèt koule a koule. Yo fèt sou yon chip heliXcyto. Yo fèt pou kaptire epi imobilize selil diferan gwosè soti nan apeprè 6 a 25 µm nan kanal koule a. Pyèj selilè yo disponib nan 3 gwosè diferan: piti, mwayen ak gwo.

Chip eliXcyto

• Chip heliXcyto yo gen yon sèl kanal mikrofluidik ak ouvèti sou chak bò. De pwen elektwòd an lò sitiye nan mitan kanal la.
• Yon pwen sèvi kòm yon pwen referans, epi dezyèm pwen an gen kaj polymère biokonpatib 3D pou kaptire selil epi li sèvi kòm yon pwen mezi. Pwen mezi a ka genyen 1 oswa 5 pyèj menm kalite.
• Pwen referans lan pèmèt referans an tan reyèl sou siyal fliyoresan yo kolekte a. Chip heliXcyto a kapab itilize ankò epi jetab.

Chip Antretyen

• Chip Antretyen an se yon chip mikrofluidik yon sèl kanal ki itilize pou tout operasyon netwayaj, tès ak antretyen.
• Operasyon sa yo enkli woutin Netwayaj & Dòmi, woutin Reveye ak Prime, lave Sistèm ak tès Fluidics. Pa sèvi ak chip sa a pou eksperyans reyèl ak solisyon selil/pwoteyin pou anpeche plis kontaminasyon nan chip la.

Kouri tanpon

• Tanpon kous la se tanpon ki itilize nan heliXcyto a pandan mezi a. Anjeneral, yo rekòmande pou itilize Tanpon Kous 1 (RB 1).
• Tanpri gade fèy konpatibilite scIC ki nan gid prensipal la pou plis enfòmasyon.

Capteurgram

• Yon sensorgram scIC se yon graf repons fluoresans an konte pa segonn (cps) sou tan, ki ilistre pwogresyon yon entèraksyon sou oswa nan selil yo. Koub sa a kapab... viewan tan reyèl nan heliOS pandan mezi a.
• Lè w ap analize sansorgram, yo detèmine eksponansyèl ki pi byen adapte ak tras fliyoresan yo obsève yo epi yo ekstrè to sinetik (kon, koff).

Pasivasyon

• Pasivasyon se yon etap opsyonèl nan pwosesis la, kote yo enjekte yon reyaktif pasivasyon sou chip la epi yo enkube l pou bloke sifas yo. Sa ka ede anpeche absòpsyon analit yo sou materyèl chip la.

Nòmalizasyon

• Yo itilize yon etap normalizasyon pou pran an kont ti diferans nan siyal yo akòz koleksyon siyal nan chak pwen mezi pa yon detektè separe. Yo enjekte yon lank fliyoresan ki gen yon konsantrasyon defini (ki baze sou pi gwo konsantrasyon analit la ak degre maketaj analit la) nan kòmansman yon tès. Etap normalizasyon sa a enkli otomatikman nan metòd mezi a, epi yo itilize pik normalizasyon ki mezire a pou korije otomatikman diferans ki genyen ant detektè yo pandan analiz done yo, anvan referans an tan reyèl.

Prensip Mezi sciC yo

Aplikasyon sciC yo

• Sitometri Entèraksyon Unicelilè (scIC) mezire vitès sinetik ak afinite yon analit ki make ak fliyoresan ki lye ak sib li a epi ki demare dirèkteman sou selil vivan yo.
• Deteksyon analit nan scIC pa depann de gwosè li, kidonk li enpòtan pou nenpòt molekil soti nan sub-nm rive nan > 100 nm epi li enpòtan pou tout klas molekil soti nan ti molekil, peptid, aptamè, nanokò, afikò, antikò, fòma antikò bispesifik, pwoteyin, konplèks pwoteyin, jiska vezikil (ekzozòm), nanopartikil lipid, ak viris.

Teknoloji scIC ka adrese domèn aplikasyon sa yo:

• mezi siyal ampLititud nan ekran obligatwa yo
• analiz sinetik pousantaj kon ak koff
• Evalyasyon afinite ak avidite atravè modèl anfòm Koff ak bifazik
• tès espesifikasyon
• kantifikasyon relatif pwoteyin manbràn sou sifas selil la
• etid sou klasman epitòp ak konpetisyon
• tès inibisyon
• evalyasyon entènalizasyon pwoteyin sib yo

Kapasite Materyèl heliXcyto

Sistèm likid

• Sistèm likid heliXcyto a resevwa jiska 3 boutèy tampon diferan, sa ki pèmèt varyasyon nan fonksyònman ak antretyen tampon an. Ponp ki nan heliXcyto a ka mete sou debi ant 20 ak 500 µL/min, pou satisfè diferan bezwen.ample ak egzijans tès yo. Kanal koule chip la konekte ak sistèm fluidik la atravè de ouvèti. Ouvèti bò gòch la konekte ak s laample, tanpon, ak liy lave, pandan ke ouvèti bò dwat la lye ak liy rejenerasyon an.
• Sistèm fluidik bidireksyonèl sa a pèmèt kaptire selil ki estab pandan y ap fè diferan etap nan yon mezi epi evantyèlman rejenerasyon chip la pou reitilizablite chip la pandan tès la.
• Figi 1. Entegrasyon chip nan sistèm fluidik

Sistèm optik

• Siyal fluoresans lan eksite pa dyòd ki emèt limyè (LED) wouj ak vèt epi detekte li pa kat kontè yon sèl foton, ki kolekte siyal wouj ak vèt nan chak tach sou tout pwofondè kanal la.
• Yo ka siveye de siyal endepandan an menm tan sou menm pwen mezi a, sa ki pèmèt mezire de entèraksyon an menm tan nan yon konfigirasyon tès doub koulè.
• Figi 2. Konfigirasyon optik
• Koleksyon siyal nan chak pwen mezi a jere pa yon detektè apa, sa ki ka lakòz ti diferans nan kontaj brit yo. Pou pran sa an kont, yo enkli yon etap normalizasyon otomatikman nan tès jenerasyon done yo.
• Anplis kontè foton endividyèl yo, enstriman an ekipe ak yon kamera CCD ak yon mikwoskòp limyè reflete. Zouti sa yo pèmèt imaj selilè an tan reyèl, sa ki pèmèt evalyasyon entegrite selilè ak kalite analit pandan tout mezi a.
• Konfigirasyon konbine sa a asire ke yo swiv tou de entèraksyon yo ak kondisyon byolojik yo, sa ki bay yon evalyasyon konplè sou eksperyans lan.

Workflow sciC

Pwosesis Mezi scIC la ka divize an 3 etap kle.

1. Konsepsyon eksperimantal nan heliOS: Chak mezi kòmanse ak konsepsyon eksperyans lan nan lojisyèl heliOS la. Yo mete an plas pwosesis tès la lè yo chwazi metòd predefini epi ajiste paramèt eksperimantal yo, tankou liy selilè yo itilize a, konsantrasyon analit la, ak kondisyon tampon yo. heliOS kalkile otomatikman kantite egzak selil yo, analit yo, tampon yo, ak lòt solisyon ki nesesè pou mezi a, sa ki senplifye pwosesis preparasyon an.
2. Preparasyon tanpon, analit, ak selil: Apre yo fin finalize konsepsyon eksperimantal la, yo prepare materyèl ki nesesè yo dapre espesifikasyon heliOS yo bay yo. Yo chaje tanpon, analit, ak selil yo nan enstriman otomatik yo.ampler.
3. Mezi ak Analiz Done: Sistèm nan fè seri mezi entèraksyon otomatik an tan reyèl ki pwograme a, san li pa bezwen okenn lòt entèvansyon nan men itilizatè a. Yo ka analize done yo pandan mezi a ap kontinye pou jwenn enfòmasyon imedya sou rezilta yo.

Tès scIC nan heliOS

Anplis tès pou jenere done, lojisyèl la bay tou metòd pou teste chip, netwayaj ak antretyen enstriman.

Tablo 1. Tès ki jenere done verifye

Sinetik sciC	Mezire tout sinetik sou selil yo ak asosyasyon analit reglabl ant 1 ak 5 konsantrasyon, ki te swiv pa yon sèl disosyasyon apre pi gwo konsantrasyon an. Swa chanèl vèt oswa wouj. Gen opsyon pou tès Analit sèlman.
Kinetik scIC - Doub Koulè	Mezire tout sinetik sou selil yo ak asosyasyon analit reglabl ant 1 ak 5 konsantrasyon, ki te swiv pa yon sèl disosyasyon apre pi gwo konsantrasyon an. Tou de chanèl vèt ak wouj aktive an menm tan. Gen opsyon pou tès Analit sèlman.
Disosyasyon scIC - Doub Koulè	Mezire disosyasyon yon analit nan selil ki te pre-enkube ak yon analit make ak fliyoresan ak kanal vèt ak/oswa wouj.

Preparasyon ak Devlopman Tès pou Mezi scIC

Gen kèk pwen pou konsidere anvan ou mete yon mezi scIC an plas.

• Konsantrasyon analit, degre etikèt, pwopriyete ak kalite.
• Solisyon normalizasyon ak pouvwa eksitasyon.
• Kalite ak manyen selilè.

Konsantrasyon Analit ak Degre Etikètaj

• Selon pratik mezi sinetik estanda yo, nou rekòmande pou chwazi yon seri konsantrasyon molè analit ki ant 0.1x ak 10x konstan disosyasyon ekilib espere a (Kd) pou plizyè sinetik konsantrasyon. Pou sinetik konsantrasyon sèl oswa mezi disosyasyon, konsantrasyon analit la ta dwe varye ant 1x ak 10x Kd espere a. Volim analit ki nesesè a, kalkile pou yon tan asosyasyon 10 minit nan yon to koule 25 µL/min, totalize apeprè 300 µL.
• Idealman, Degre Maketaj (DOL) pou yon analit ta dwe 1, byenke valè DOL 2 oswa 3 yo toujou akseptab. Sepandan, sonje ke yon pi gwo kantite makè sou yon analit ka gen enpak sou pwopriyete lyezon li yo, epi li ka ogmante chans pou agregasyon oswa lyezon ki pa espesifik. Pou reyalize yon DOL optimal, swiv pwotokòl ki vini ak Twous Maketaj ki gen lank wouj oswa vèt ki soti nan liy reyaktif heliXcyto yo.
  Nòmalizasyon
• Nòmalizasyon se premye etap nan tout metòd pou jenere done. Li konpanse pou ti varyasyon siyal ki koze pa itilizasyon detektè separe pou chak pwen mezi. Nan etap sa a, yo enjekte yon lank fliyoresan nan yon konsantrasyon defini pa itilizatè a nan kòmansman tès la.
• Yo kalkile konsantrasyon Solisyon Normalizasyon an lè yo miltipliye pi gwo konsantrasyon analit ki make ak fliyoresans ki te itilize nan mezi a pa Degre Maketaj (DOL) analit la. Konsantrasyon sa a gide puisans eksitasyon LED ki aplike pandan mezi a. Objektif la se pou pik Solisyon Normalizasyon an rive apeprè nan menm siyal fliyoresans lan. amplititid kòm pi gwo konsantrasyon analit la.
• Gade tablo konsantrasyon solisyon Normalizasyon an nan gid prensipal la pou mete valè inisyal yo. Remake byen ke tablo a gide paramèt inisyal yo, men ou ka ajiste plis pouvwa eksitasyon LED la pandan devlopman tès la.

Kalite ak Preparasyon Selilè

• Viabilite selilè a ta dwe pi wo pase 95%, epi selil yo ta dwe jeneralman nan yon bon kondisyon. Pou selil adezif yo, nou rekòmande pou w travay avèk selil ki gen 50-70% konfluans.
• Pou selil sispansyon yo, nou rekòmande pou yo rekòlte yo nan faz mitan kwasans lan. Yo bezwen 50 µl sispansyon selilè a 1E+06 selil/mL pou chak seri.

Rekòlte selil sispansyon

1. Santrifije apeprè 2E+06 selil a 300 g pandan 7 minit pou retire medya kilti selilè a. Jete sipènatant la.
2. Lave selil yo yon fwa lè w resispann grenn selilè a nan apeprè 1 mL DPBS. Santrifije sispansyon an a 400 g pandan 5 minit pou fè grenn selil vivan yo. Jete sipènatan an avèk prekosyon pou retire fragman yo ak medya a.
3. Resispann sispansyon an dousman nan 1 mL DPBS, transfere sispansyon an sou yon paswa selilè epi pase sispansyon an anba koule gravite.
4. Mezire konsantrasyon selilè nan sispansyon filtre a epi ajiste li a 1E+06 selil/mL.
   • KONSÈY: Gen kèk selil sispansyon ki gen tandans fòme gwoup. Resispann gwoup yo dousman epi fè yon etap filtraj anvan premye etap santrifijasyon an.
   • Sèvi ak pwent pipèt ki gen laj pwent lè w ap manyen sispansyon selilè pou evite fòs tayisman ki wo pandan transfè oswa resispansyon.

Rekòlte selil aderan yo

1. Lave selil yo ak DPBS esteril.
2. Separe selil yo nan flakon kilti a lè l sèvi avèk reyaktif disosyasyon ou prefere a (pa egzanp TrypLE).
3. Resispann selil disosye yo nan volim medya ou prefere a epi filtre ak yon paswa selilè 30 nm.
4. Opsyonèlman, ajoute EDTA nan ka selil yo ki byen kole (5 mM konsantrasyon final).
5. Santrifije selil yo a 300 g pandan 7 minit pou retire medya kilti selilè a. Jete sipènatant la.
6. Resispann selil yo nan 1 mL DPBS.
7. Mezire konsantrasyon selilè a epi ajiste li a 1E+06 selil/mL.
   • KONSÈY: Yo ka itilize medya selilè dilye 1:4 ak DPBS pou ajoute eleman nitritif nan selil yo.amples nan ka selil sansib oswa pwosesis tès ki long.

Fiksasyon Selilè

1. Santrifije jiska 10E+06 selil a 300 g pandan 7 minit pou retire medya kilti selilè a. Jete sipènatant la.
2. Resispann grenn selilè a nan 1 mL PBS, santrifije epi jete sipernatant la.
3. Resispann grenn selilè a nan 500 µL PBS/2% PFA (62.5 µL solisyon 16% PFA + 437.5 µL PBS).
4. Enkube selil yo nan tanperati chanm pandan 10 minit (avèk souke yo dousman detanzantan).
5. Ajoute 500 µL PBS epi santrifije sispansyon an a 400 g pandan 5 minit pou retire PFA a.
6. Jete supernatant la.
7. Resispann selil yo nan 1 mL PBS, filtre yo nan yon paswa selilè 30 µm, santrifije yo (400 g, 5 min) epi jete sipènatant la.
8. Resispann selil yo nan apeprè 1 mL PBS (opsyonèl: ajiste a yon konsantrasyon final 5E+06 selil/mL).
9. Sere selil fiks yo nan yon tanperati 2-8°C, itilize yo nan yon mwa.
   • Si ou bezwen repare plis selil, tanpri ogmante tout kantite yo kòmsadwa.
   • REMAK: Yo ka ajiste vitès santrifijasyon an pandan rekòlte selil yo selon kalite selil la, si selil yo sansib epi yo souvan itilize fòs g ki pi ba.
   • Konsantrasyon PFA a ka varye ant 0.5 ak 4%.

Konfigirasyon tès scIC la

Yo ta dwe enkli tès scIC sa yo nan devlopman tès la epi yo ka repete yo nan travay tès yo pita.

Pwosesis devlopman tès la divize an 3 etap diferan youn apre lòt:

1. Tès chip sito
2. Tès analit sèlman
3. Tès sinetik

Tès Chip Sito

• Anvan ou itilize yon chip sito nan yon mezi, ou bezwen evalye kalite yon nouvo chip. Kòmanse pa fè yon Tès Chip Sito apa. Gade chapit chip sito Helix la nan gid prensipal la sou kijan pou mete kanpe epi evalye yon tès chip.

Tès Analit Sèlman

• Devlopman yon tès scIC kòmanse avèk yon Tès Analit Sèlman, ki evalye konpòtman analit ki make ak fliyoresan sou yon sifas chip fre san selil.
• Yo kapab repete tès sa a detanzantan tou pou evalye estabilite analit ki make yo. Yo ka konfigire tès scIC Analyte Only nan tès Kinetics yo lè yo aktive kaz Analyte only ki anba paramèt Selil yo.
• Pou evalyasyon kalite analit la, pi gwo konsantrasyon ki itilize a sifizan epi ou ka konfigire li lè w enfim tout asosyasyon yo eksepte youn nan tès la.

Konfigirasyon Workflow Tès Sinetik

• Nòmalman, yo itilize tès sinetik la nan yon workflow otomatik ki gen ladan tou de tès pou jenere done ak eleman antretyen. Yon fwa analit la fin pase tès kontwòl kalite Analit sèlman an, yo ka itilize li nan yon mezi sou selil yo.
• To quantify kinetic rates reliably, the signal response during association should be concentration-dependent, increasing with higher analyte concentrations.
• Konsantrasyon ki pi wo a ta dwe rive nan yon plato, ki endike ke yo rive nan yon eta fiks pou lyezon an. Disosyasyon an bezwen dire ase lontan pou dekole yon pòsyon enpòtan nan analit ki lye a (plis pase 5%) pou pèmèt yon ajisteman serye nan koub la.
• Sèvi ak paramèt defo yo nan kondisyon tès yo kòm yon pwen depa epi ajiste plis selon rezilta ou yo.

Examp1. Pwosesis tès rekòmande a

Pwosesis tès la pèmèt itilizatè yo mete metòd mezi ak antretyen yo nan fil datant selon bezwen eksperimantal espesifik yo.

Yon pwosesis tès ka gen ladan etap sa yo nan lòd ki endike a:

1. Premye (chip antretyen)
2. Sinetik scIC (Selil A, Analit A, Sito-chip)
3. Lave Sistèm (Chip Antretyen)
4. Sinetik scIC (Selil B, Analit A, Sito-chip)
5. Lave Sistèm (Chip Antretyen)
6. Kinetik scIC konfigire pou analit sèlman (Analit A, chip Sito)
   • Etap Prime ak Sistèm Wash yo fèt sou yon Chip Antretyen. Yon Sistèm Wash enkli lè w ap chanje liy selilè epi anvan ou fè Tès Analit Sèlman an nan fen workflow la.
   • Pou plis detay, gade seksyon sou lave sistèm Cyto a nan gid prensipal la.
   • Lè w ap mete tès sinetik sou selil yo nan fil datant, konsidere viabilité selilè a, ki depann de liy selilè a.
   • Pou liy selil sansib yo, li rekòmande pou fè sèlman 1-2 tès pou chak pwosesis tès. Pou liy selil ki pi rezistan, yo ka mete plis tès nan fil datant.
   • REMAK: Pou lòt tès, prepare solisyon selilè a nan ti boutèy separe lè w bay selil yo non diferan.
   • Asire w tout reyaktif yo fre epi yo pase nan yon filtè 0.22 µm. Finalman, mete reyaktif yo prepare nan enstriman an jan heliOS la enstwi w la.
   • Ou ka kòmanse tès la lè w klike sou ikòn flèch ble "Run" nan epi swiv etap ki nan Assay Start Wizard la.
   • Yon fwa tès la kòmanse, aparèy la fonksyone poukont li jiskaske tout pwosesis la fini.

Analiz eksperyans scIC yo

Workflow analiz scIC

• Done scIC yo ka diferan de done byosansè estanda yo akòz konpleksite natirèl evènman ki rive sou selil yo kaptire sou sifas chip heliXcyto a, sa ki ka lakòz iregilarite nan captorgram.
• Se poutèt sa, yo mete aksan sou kontwòl kalite pou imaj yo pran nan chak etap mezi a ak pou sensorgram yo pwodui nan paj aterisaj analiz otomatik la.
• Anplis de sa, heliOS bay zouti pou adrese iregilarite kapteurgram pandan analiz done manyèl scIC.

Pwosesis analiz done scIC:

1. Enspeksyon Imaj:
   • Enspekte tout imaj yo te pran pandan mezi a (onglet Imaj nan fenèt eksperyans lan).
   • Konbyen selil ki te rete estab nan pyèj yo pandan tout mezi a?
   • Ki eta selil yo ye? Tcheke granularite ak entegrite selil yo.
   • Èske pyèj yo pwòp apre etap rejenerasyon an?
2. Verifikasyon done brit:
   • Egzamine done brit yo pou pwen referans 1 ak pwen mezi 2.
   • Siyal pik normalizasyon an ta dwe pre oswa pi wo pase pi gwo siyal done brit la.
   • Èske siyal la retounen nan nivo debaz la sou tou de tach yo, oubyen èske gen prèv lyezon ki pa espesifik?
3. Verifikasyon Done Normalize:
   • Èske so enjeksyon pou tach 1 ak tach 2 yo ap sipèpoze byen?
4. Verifikasyon Done Referans:
   • Èske etap rejenerasyon an pote siyal la tounen nan nivo debaz la? Si non, tcheke si gen selil oswa debri nan pyèj yo apre rejenerasyon an lè w re-viewfè imaj yo.
   • Èske gen pik, valè aberan, oswa lòt iregilarite nan koub referans yo? Si se wi, re-view imaj yo pou idantifye kòz potansyèl yo epi konsidere ajisteman manyèl.
5. Verifikasyon Konpatibilite Done yo:
   • Fè yon evalyasyon kalite vizyèl
   • Èske ajisteman an dekri konpòtman koub yo avèk presizyon, oubyen èske liy ajisteman an kwaze kapteurgram nan?
   • Èske ajisteman an byen dekri koube done yo?
   • Èske la ampLititid la konsistan avèk done referans yo?

Analiz Done Otomatik scIC

• Analiz otomatik scIC la trete done brit yo an graf kontwòl kalite ak done ajiste an jis kèk klik.
  1. Louvri yon eksperyans scIC lè w double-klike sou eksperyans ou chwazi a nan Lis Eksperyans lan.
  2. Klike sou gwo bouton ble Analize ki anba onglet eksperyans lan.
  3. Nan workflow eksperyans lan, chwazi tès ou vle analize a.
  4. Chwazi Kinetics scIC pami kalite analiz ki disponib yo epi klike sou Next.
     • REMAK: Si eksperyans lan ap kontinye, se sèlman tès ki fini yo ki pral parèt nan lis la. Yon fwa ou chwazi yon tès, pwochen fenèt la ap montre tout kalite analiz ki disponib espesifik pou metòd/tès ki itilize a.
  5. Si sa nesesè, konfigire analiz la nan fenèt ki anba la a. Modèl ajisteman pa defo a se "Kinetics – Free end level" ak kaz "Forse fit end level to Zero" aktive. Devye de modèl sa a sèlman si byoloji oswa done yo mande yon deskripsyon ki pi konplèks.
  6. Yon fwa konfigirasyon an finalize, klike sou Analize pou wè tout snapshot yo, kapteurgram brit ak trete yo, ak valè sinetik yo.
• Akòz konpleksite natirèl nan s laampLè yo itilize pou tès scIC, sensorgram ki kapab lakòz yo ka gen iregilarite.
• Pou adrese sa, yo mete aksan sou kontwòl kalite imaj ak sansorgram nan analiz otomatik la.
• Si ou bezwen koreksyon manyèl oswa yon analiz ki pi pwofon, gen zouti pou koreksyon atifak ki disponib nan Scratchpad analiz manyèl la.

Antretyen ak Dekontaminasyon heliXcyto

• Antretyen heliXcyto a esansyèl pou asire pèfòmans optimal enstriman an ak lonjevite li. Antretyen regilye a gen ladan pwosedi netwayaj ki anpeche kontaminasyon epi kenbe entegrite sistèm nan, sa ki pèmèt rezilta egzat ak operasyon san pwoblèm. Swen konsistan enpòtan anpil pou fyab enstriman an ak kalite rezilta eksperimantal yo.
  Antretyen heliXcyto a gen ladan de pwosedi kle: Lave Sistèm Sito a, ki ka entegre dirèkteman nan yon workflow tès, ak Netwayaj & Dòmi, ki fèt kòm yon woutin apa pou kenbe enstriman an jis anvan ou itilize li apre yon mezi ki pi long pandan lannwit lan oswa lè li pa itilize pou plis pase 2 jou.
• Tou de System Wash ak Clean & Sleep mande pou prezans yon heliX® Maintenance Chip nan plato chip la.

Woutin Netwayaj ak Dòmi

• Woutin Netwayaj & Dòmi an fèt pou netwaye epi fèmen/depoze aparèy la. Metòd la rense tib fluidik yon aparèy heliX® an premye avèk dlo ultrapi epi answit avèk 70% etanòl. Finalman, tout tib yo vantile avèk lè.
• Pwosedi netwayaj sa a konplètman otomatik epi li pran apeprè 40 minit. Pandan pwosedi a, etanòl la vide nan boutèy dlo a, kidonk ou dwe jete sa ki nan boutèy la apre sa.
• Apre yon Netwayaj & Dòmi, enstriman an antre nan yon mòd dòmi epi li pa ka itilize jiskaske yo fè yon Reveye & Prime. Yon Chip Antretyen heliX® nesesè pou tou de kous yo.
• ENPÒTAN: Pou anpeche tib la kontaminasyon, asire w ou jete sa ki nan boutèy dlo a (melanj dlo/etanòl) epi vide resipyan fatra a apre pwosedi netwayaj la.

Fèmen ak depo alontèm

• Pou peryòd pwolonje san itilizasyon, tanpri retire boutèy ki gen dlo ak etanòl la nan plato tanpon an apre pwosedi Netwayaj & Dòmi an epi kite tib la ekspoze a lè a.
• Retire tou Chip Antretyen heliX® la, epi mete l nan sak orijinal li. Sa anpeche likid koule an aryè ak kontaminasyon. Etenn aparèy la.

Lave sistèm sito

• HeliXcyto System Wash netwaye sistèm mikrofluidik la an pwofondè avèk Solisyon Netwayaj 3 (CS3) nan apeprè 45 minit. CS3 ranmase nan de segonn.tages. Premye zegwi ak sampYo ranpli bouk la epi yo enkube l pou retire nenpòt kontaminan.
• REMAK: Fè yon Cyto System Wash omwen yon fwa pa jou lè aparèy la ap itilize. Nou rekòmande pou ajoute metòd Cyto System Wash la nan yon workflow tès swa apre chak tès (lè w ap chanje liy selilè oswa si...).ampbon jan kalite a pa optimal) oubyen nan fen yon workflow tès. Chanje chip antretyen an apre yon maksimòm 50 lave sistèm sito ki parèt kòm konte rejenerasyon nan plato Chip la. view nan kontwòl Aparèy la.

Kontakte

• Dynamic Biosensors GmbH
• Perchtinger Str. 8/10
• 81379 Minik
• Almay
• Bruker Scientific LLC
• 40 Manning Road, Manning Park
• Billerica, MA 01821

USA

• Enfòmasyon sou lòd order.biosensors@bruker.com
• Sipò teknik sipò.dbs@bruker.com
• www.dynamic-biosensors.com
• Enstriman ak chips yo Enjenieri ak manifaktire nan Almay.
• ©2025 Dynamic Biosensors GmbH
• Pou itilize rechèch sèlman. Pa pou itilize nan pwosedi dyagnostik klinik yo.

FAQ

Kesyon yo poze souvan sou sciC

Èske mwen ka reitilize chip heliXcyto a?

Wi, chip heliXcyto a kapab itilize ankò epi jetab. Swiv enstriksyon netwayaj ak depo ki apwopriye yo.

Ki objektif Chip Antretyen an?

Chip Antretyen an itilize pou netwayaj, tès, ak operasyon antretyen pou asire bon fonksyònman sistèm nan.

Konbyen fwa mwen ta dwe netwaye aparèy la?

Sistèm likid heliXcyto a rete pwòp avèk metòd Cyto System Wash ak Clean&Sleep. Li rekòmande pou netwaye sistèm mikrofluidik la atravè Cyto System Wash sou yon Maintenance Chip apre chak tès (sitou lè w ap chanje kalite selil) oubyen pi ta nan fen yon workflow tès. Pwosedi Clean&Sleep la dwe aplike touswit anvan w itilize li apre yon mezi long anvan (pa egzanp nan maten apre yon eksperyans lannwit) oubyen lè heliXcyto a p ap itilize pou plis pase 2 jou apre ou fin fèmen l.

Konbyen tan solisyon sa yo: RB 1 / dlo / CS 1 / CS 3 / solisyon normalizasyon an ka rete estoke nan aparèy la?

Anjeneral, anvan chak mezi, yo dwe egzamine tout solisyon yo pou wè si yo gen volim ki rete a epi pou wè si gen twoub oswa presipitasyon ki ka parèt. Nan yon ka konsa, yo bezwen chanje solisyon an imedyatman. Yo dwe ranplase dlo a ak RB 1 chak jou epi yo dwe filtre RB 1 anvan chak mezi. Yo ka itilize solisyon Normalizasyon dilye a pandan 2 jou youn apre lòt. Solisyon Netwayaj yo estab pou apeprè 3 jou.

Konbyen tan mwen ka itilize chip heliXcyto a?

Ou ka verifye dat ekspirasyon chip heliXcyto a nan onglet Chip tray nan seksyon Device nan heliOS. Pa gen okenn garanti pou entegrite chip la apre dat ekspirasyon an. Sepandan, toutotan pyèj yo rete estab, sifas la pwòp, epi background fliyoresans lan anba limit ki endike nan Tès Chip la, yo konsidere chip la itil pou mezi yo. Netwayaj ekstèn chip regilye (yo rekòmande pou fè kit Netwayaj Chip CCK-1-1 apre w fin itilize chip la pou pwolonje lavi chip la anpil.

Konbyen tan mwen ka itilize chip antretyen an?

Fòk ranplase chip antretyen an apre 50 lave sistèm (yo konte kòm rejenerasyon nan onglet Chip tray nan kontwòl Aparèy la nan heliOS).

Konbyen fwa yo ta dwe fè tès heliXcyto Chip la?

Tès Chip la kolekte enfòmasyon sou background fliyoresans, pwòpte, ak entegrite chip la anvan yo kòmanse yon nouvo eksperyans. Li dwe fèt omwen yon fwa lè y ap itilize yon nouvo chip, men li rekòmande pou fè li anvan oswa nan kòmansman chak eksperyans pou tcheke eta chip la. Sa pèmèt kondisyon mezi yo dwe ajiste epi anomali nan detèktègram yo ka remonte nan chip la oswa aparèy la.

Ki sa ki se pwodui chimik pou make analit la?

Yon koloran fliyoresan wouj oswa vèt, respektivman, makonnen pa twous etiktaj nou yo atravè NHS-estè ak amin prensipal nan analit pwoteyin (pa egzanp lizin oswa N-tèminal). Ou ka jwenn detay ak yon seksyon depanaj nan manyèl heliXcyto Labeling Kit lank wouj (Labeling Kit lank wouj 2 CY-LK-R2-1) ak heliXcyto Labeling Kit lank vèt (Labeling Kit lank vèt CY-LK-G1-1) nou yo. webboutik.

Ki kote pou jwenn kalifikasyon ak enfòmasyon sou lisans heliOS la?

Pwosesis pou antre enfòmasyon sou kalifikasyon ak lisans lan dekri nan seksyon Enstalasyon heliOS nan gid heliXcyto nou an. websit la (gid heliXcyto). Enfòmasyon lisans ou a ta dwe sove nan dosye scIC la sou òdinatè heliXcyto a, ke Espesyalis Aplikasyon nou an te kreye pandan fòmasyon an.

Ki nivo eksitasyon/emisyon heliXcyto a ye?

Eksitasyon an wouj se 605-625 nm, emisyon (deteksyon) an se 655-685 nm. Eksitasyon an vèt se 490-510 nm, emisyon an vèt se 525-575 nm.

Konbyen fwa mwen dwe mezire menm eksperyans lan pou fyab estatistik?

Pou reyalize to sinetik mwayèn ki fyab, yo rekòmande pou fè 3-4 repetisyon mezi sinetik 3-konsantrasyon nan yon popilasyon selil omojèn. Nan yon seri done ki konsistan, to asosyasyon ak disosyasyon replikasyon yo ta dwe nan yon fenèt 2-4 fwa.

Ki sansiblite mezi scIC yo?

Limit deteksyon ki pi ba a an tèm de ekspresyon sib la depann de etikèt analit la, men tipikman scIC ka deja mezire sinetik sou sèlman 1000-10000 molekil pa selil. Pou ogmante sansiblite, yo rekòmande pou kaptire omwen 5 selil, epi yo dwe balanse analit DOL 5-10 ak puisans LED pou reyalize maksimòm kantite fluoresans.

Ki limit deteksyon heliXcyto a an tèm de vitès sinetik?

Tanpri gade espesifikasyon teknik heliXcyto a pou limit teknik ki pi ajou yo, ke ou ka jwenn nan gid heliXcyto a (gid heliXcyto). Konstan disosyasyon Kd: 10 pM a 1 mM Konstan vitès asosyasyon kon: 1E3 a 1E7 M-1s-1 Konstan vitès disosyasyon koff: 1E-6 a 1 s-1 Pou enfòmasyon detaye, tanpri tcheke gid heliXcyto nou an nan... websit.

Dokiman / Resous

Sistèm analiz laboratwa konplètman otomatik heliX cyto dinamik BIOSENSORS [pdfManyèl Itilizatè Sistèm analiz laboratwa konplètman otomatik heliX cyto, heliX cyto, Sistèm analiz laboratwa konplètman otomatik, Sistèm analiz laboratwa otomatik, Sistèm analiz laboratwa, Sistèm analiz, Sistèm

Referans

• Manyèl itilizatè